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Confection manuelle des frottis sanguins

Matériel nécessaire
Pour obtenir des frottis sanguins de bonne qualité, il faut avoir à disposition:
  1. une surface de travail
  2. du sang prélevé sur EDTA
  3. des lames de verres propres et dégraissées
  4. des tampons de cellulose
  5. des capillaires de 100 µl
  6. un crayon pour marquer les frottis
  7. un récipient pour les déchets.

Toute manipulation de sang exige le port de gants.
La confection de frottis sanguins peut s'effectuer selon deux méthodes:

Première méthode
  • Mélangez le contenu du tube de sang prélevé sur EDTA par renversements successifs.
  • Ouvrez le tube à l'aide d'un tampon de cellulose.
  • Introduisez un capillaire dans le tube.
  • Disposez deux lames sur la surface de travail.
  • Déposez une goutte de sang de 2 mm de diamètre à environ 1 cm du bord de la première lame.
  • Placez le bord de la deuxième lame en arrière de la goutte de sang.
  • Abaissez la deuxième lame sur la première.
  • Attendez que la goutte de sang soit uniformément étalée.
  • Tirez la deuxième lame sur la première jusqu'à séparation complète.
  • Séchez le frottis par une brève agitation à l'air ambiant.
  • Contrôlez la qualité du frottis en l'examinant à contre-jour.
  • Marquez immédiatement les frottis au crayon afin d'éviter toute erreur ultérieure d'identification.

Preparing a Pushed Film
Les trois premières étapes sont identiques à celles décrites pour la première méthode, soit:
  • Mélangez le contenu du tube de sang prélevé sur EDTA par renversements successifs.
  • Ouvrez le tube à l'aide d'un tampon de cellulose.
  • Introduisez un capillaire dans le tube.
Des différences interviennent dès le point suivant:
  • Disposez deux lames sur la surface de travail.
  • Déposez une goutte de sang de 2 mm de diamètre à environ 1 cm du bord de la première lame.
  • Placez le bord de la deuxième à 45° en avant de la goutte de sang.
  • Mettez en contact le bord de la lame avec la goutte de sang et attendez que le sang se répartisse par capillarité sur toute la largeur de la lame.
  • Abaissez légèrement la deuxième lame, puis, d'un mouvement régulier, étalez la goutte en poussant la deuxième lame sur la première tout en exerçant une légère pression.

Les opérations suivantes sont semblables à celles de la première méthode, soit:

  • Séchez le frottis par une brève agitation à l'air ambiant.
  • Contrôlez la qualité du frottis en l'examinant à contre-jour.
  • Marquez immédiatement les frottis au crayon afin d'éviter toute erreur ultérieure d'identification.